一般需要间隔24小时以上才会做第二次。
核酸检测采集后的标本通过实验室进行检测，目前是筛查新型冠状病毒肺炎患者的确诊病例、疑似病例、无症状感染者的重要方法，一般第二次间隔时间需要大于24小时，因为新型冠状病毒进行病毒复制时存在间歇性，过了24小时后给病毒复制的时间，此时再采集病毒核酸样本，可能才会检测阳性结果，而且新冠病毒潜伏期有14天之久，14天内都可以间隔时间进行采样确诊。
如果是被检测者有密切接触的流行病学史，或者有间接的接触经历，只要条件允许，或是结果因采样操作不准确等因素阴性的，为了快速确诊患者，有时两次核酸检测不考虑间隔时间也应该进行第二次检测。